研究生: |
周千慧 ZHOU, QIAN-HUI |
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論文名稱: |
於離體狀況下誘導人類淋巴球產生抗B型肝炎表面抗原抗體製造細胞之探討 In vitro induction of human lymphocytes to generate HBsAg specific antibody forming cells |
指導教授: |
曾哲明
Tseng, Jer-Ming |
學位類別: |
碩士 Master |
系所名稱: |
生命科學系 Department of Life Science |
畢業學年度: | 80 |
語文別: | 中文 |
論文頁數: | 56 |
中文關鍵詞: | B型肝炎表面抗原 、細胞 、淋巴球 |
論文種類: | 學術論文 |
相關次數: | 點閱:154 下載:0 |
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製造出人類抗B型肝炎表面抗原的單株抗體,是目前預防治療B型肝炎的研究方向之
一。製造單株抗體的首要步驟為增加分泌抗B型肝炎表面抗原(HBsAg) 抗體的B
淋巴球數目,可行的方法是抽取抗B型肝炎表面抗原抗體呈陽性反應者之血液,分離
出週圍血液單核細胞(PEMN)後,在離體的情況下,以抗原刺淚活化淋巴球,增加抗B
型肝炎表面抗原抗體製造細胞目。本實驗從帶B型肝炎表面抗原患者血漿中以親和性
管柱純化B出型肝炎表面抗原,此B型肝炎表面原經電泳決定是為GP27的majorprot-
ein ,其與人類血清白蛋白聚合物(polymerizedhumanserum albumin) 結合在一起,
故純化出的b型肝炎表面抗原占整個蛋白含量的1.5%。隨後利用此抗原和pwm(pokew-
eed mitogen)活化週邊血液B淋巴球,以60ng/ml B型肝炎表面抗原和10ug/ml PWM
的濃度,一齊刺淚週圍血液單核細胞效果最佳,有較好的活細胞數目、細胞存活率,
更重要的有較多數目的抗體製造細胞。但因活細胞數目不足以成功的製造出融合瘤,
另一增加抗B型肝炎表面抗原抗體製造細胞的方法,為利用Epstein Barrvirus(EBV)
活化B淋巴球,EBV 能夠轉形週邊血液B淋液B淋巴球成不死的細胞株,可誘導免疫
球蛋白的分泌,同時也可篩選出分泌抗B型肝炎表面抗原抗體的細胞株,由本實驗中
發現,EBV 活化的B淋巴球分裂一段時間之後,便停留在休眼狀態,需要加入其他因
子例如:Hep-G2方能促使其再度分裂增殖。因此若取得抗B型肝炎表面抗原抗體效價
很高之捐血者血液,以EBV 感染二星期之後與老鼠骨髓瘤融合,應可獲得人類抗B型
肝炎表面原單株體的融合瘤。