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研究生: 周千慧
ZHOU, QIAN-HUI
論文名稱: 於離體狀況下誘導人類淋巴球產生抗B型肝炎表面抗原抗體製造細胞之探討
In vitro induction of human lymphocytes to generate HBsAg specific antibody forming cells
指導教授: 曾哲明
Tseng, Jer-Ming
學位類別: 碩士
Master
系所名稱: 生命科學系
Department of Life Science
畢業學年度: 80
語文別: 中文
論文頁數: 56
中文關鍵詞: B型肝炎表面抗原細胞淋巴球
論文種類: 學術論文
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  • 製造出人類抗B型肝炎表面抗原的單株抗體,是目前預防治療B型肝炎的研究方向之
    一。製造單株抗體的首要步驟為增加分泌抗B型肝炎表面抗原(HBsAg) 抗體的B
    淋巴球數目,可行的方法是抽取抗B型肝炎表面抗原抗體呈陽性反應者之血液,分離
    出週圍血液單核細胞(PEMN)後,在離體的情況下,以抗原刺淚活化淋巴球,增加抗B
    型肝炎表面抗原抗體製造細胞目。本實驗從帶B型肝炎表面抗原患者血漿中以親和性
    管柱純化B出型肝炎表面抗原,此B型肝炎表面原經電泳決定是為GP27的majorprot-
    ein ,其與人類血清白蛋白聚合物(polymerizedhumanserum albumin) 結合在一起,
    故純化出的b型肝炎表面抗原占整個蛋白含量的1.5%。隨後利用此抗原和pwm(pokew-
    eed mitogen)活化週邊血液B淋巴球,以60ng/ml B型肝炎表面抗原和10ug/ml PWM
    的濃度,一齊刺淚週圍血液單核細胞效果最佳,有較好的活細胞數目、細胞存活率,
    更重要的有較多數目的抗體製造細胞。但因活細胞數目不足以成功的製造出融合瘤,
    另一增加抗B型肝炎表面抗原抗體製造細胞的方法,為利用Epstein Barrvirus(EBV)
    活化B淋巴球,EBV 能夠轉形週邊血液B淋液B淋巴球成不死的細胞株,可誘導免疫
    球蛋白的分泌,同時也可篩選出分泌抗B型肝炎表面抗原抗體的細胞株,由本實驗中
    發現,EBV 活化的B淋巴球分裂一段時間之後,便停留在休眼狀態,需要加入其他因
    子例如:Hep-G2方能促使其再度分裂增殖。因此若取得抗B型肝炎表面抗原抗體效價
    很高之捐血者血液,以EBV 感染二星期之後與老鼠骨髓瘤融合,應可獲得人類抗B型
    肝炎表面原單株體的融合瘤。

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