研究生: |
曾梅慧 Mei-Hua Jane |
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論文名稱: |
水稻懸浮細胞對環境壓力之反應 Responses of the Environmental Stress of Culture Rice Cells |
指導教授: |
童武夫
Tong, Wu-Fu |
學位類別: |
碩士 Master |
系所名稱: |
生命科學系 Department of Life Science |
畢業學年度: | 82 |
語文別: | 中文 |
中文關鍵詞: | 水稻; 壓力; 酵素;蛋白質 |
英文關鍵詞: | Rices; Stress; Enzyme; proteine |
論文種類: | 學術論文 |
相關次數: | 點閱:306 下載:0 |
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本研究探討水稻(Oryaz sativa cv. Tianan 5)懸浮細胞在缺磷、含鹽(
NaCl)、含過氧化氫(H2O2)及有添加真菌抽出物等環境變因處理下細胞
之生長及細胞的生理反應。20 mM NaCl、1.63 uM H2O2及真菌抽出物對細
胞生長在七天內並無明顯影響,而缺磷顯著抑制細胞的生長。除1.63 uM
H2O2 處理外,缺磷、20 mM NaCl及真菌抽出物都會降低細胞內可溶性蛋白
質的含量。培養基 NaCl 的濃度及 H2O2 的濃度分別在 400 mM 及326 uM
以上細胞即開始出現白化現象而死亡。細胞內 POX、SOD、CAT的活性都會
受到20 mM NaCl、1.63 uM H2O2及真菌抽出物的影響而升高。缺磷處理可
以顯著誘導細胞內 APase活性之增高。水稻細胞在培養期間會分泌 POX、
SOD、APase 至培養基中,其中以 APase活性受 20 mM NaCl、缺磷的影響
較為顯著。以電泳分析可以觀察到細胞內至少有三種 Fe-SODS、四種 Mn-
SODS 及二種 Cu-SODS 異構.blksq.。 APase異構.blksq.的活性表現強度
會受環境變因的影響,APⅢ異構 .blksq.的表現受到缺磷、20 mM NaCl及
及真菌抽出物的誘導產生,相對地 APⅡ及APⅣ異構.blksq.的活性則消失
,缺磷誘導主要表現在APⅠ異構.blksq. 活性的增強。以 10﹪ SDS-PAGE
分析細胞內及分泌至培養基可溶性蛋白質,發現有些蛋白質含量會受 20
mM NaCl、 1.63 uM H2O2、真菌抽出物及缺磷等環境變因的影響而改變。
缺磷細胞內 PSP26及 59 KD 的蛋白質帶含量顯著升高。若將細胞自含20
mM NaCl培養基移植至含 400 mM NaCl培養基後第五天,有一條高於97 KD
的蛋白質帶含量明顯增加 ,此蛋白質可能與細胞在鹽逆境的生理反應有
關係,另外三條 88 KD、45 KD、40 KD 的蛋白質帶的含量隨著鹽濃渡的
的增高而逐漸下降。20 mM NaCl、1.63 uM H2O2及真菌抽出物都會降低細
胞外97KD、64KD、55KD蛋白質帶的含量,並且增加 100KD及90KD蛋白質帶
的含量。20 mM NaCl誘導細胞分泌42KD的蛋白質,而缺磷使細胞外的35KD
蛋白質含量顯著增加。此結果顯示環境因素的改變會使細胞抑制某些蛋白
質或是促使這些蛋白質分解加速,同時也會有新的蛋白質合成,以便細胞
能更妥善適應新的環境。