Author: |
劉自強 |
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Thesis Title: |
超氧陰離子電化學檢測方法之研究 |
Advisor: | 林如章 |
Degree: |
碩士 Master |
Department: |
化學系 Department of Chemistry |
Academic Year: | 85 |
Language: | 中文 |
Number of pages: | 60 |
Keywords (in Chinese): | 超氧陰離子 、鈀微粒 、超氧歧化酵素 、過氧化月每 、玻璃化碳電極 、細胞色素C |
Thesis Type: | Academic thesis/ dissertation |
Reference times: | Clicks: 162 Downloads: 0 |
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活性氧物種在生理環境及自然界中皆扮演了極重要的角色,這些物種有殺菌及抗腫瘤作用,在生理上擔起極其重要的代謝及保護功能;但是過剩的這些物種同時也會引起許多疾病,甚至與基因的突變、演化的進行、細胞的老化及死亡等都息息相關。
而活性氧物種之一的超氧陰離子除了本身的毒性外,更是其它毒性更強之活性氧物種如H2O2、HO等的啟動因子,故超氧陰離子在所有的活性氧物種之中佔有極重要的地位。但可惜的是,當今科學家研究的重點皆集中在超氧歧化酵素(SOD)與各種疾病或是生理障礙的相關研究,卻鮮少有科學家將著眼點放在超氧陰離子的定量研究上。
本研究的目的,在以電化學方法開發檢測超氧陰離子之酵素電術,以期能達到定量檢測的目的。研究中以電析鈀金屬微粒碳電極(Pd/GC)為電極基材以降低H2O2之氧化過電壓,再以戊二醛(GA)為架橋基固定超氧歧化酵素於Pd/GC電極上使之對超氧陰離子有選擇性,最後再電聚合一層PPD膜以隔絕幹擾及保護酵素使之不易脫落,如此便得到本研究之超氧陰離子檢測電極(PPD/SOD/Pd/GC)。以此電極對由xanthine-xanthien oxidase(XOD)混合而得之超氧陰離子產生系統做檢測,結果發現在含有固定濃度之XOD溶液中,在xanthine濃度範圍1.5x10-7~1.0x10-4M有線性關係,此時超氧陰離子的濃度為<4.3x10-7~5.5x10-5M。
本研究另外還在酵素層中加入過氧化脢(peroxidase,HRP),已知其對H2O2具有選擇性的催化效果,再利用鈀微粒幫助HRP的電子直接傳導作用可使HRP之還原過電壓降至0V(vs.Ag/AgCl)附近,再以此電極對由xanthine-xanthine oxidase(XOD)混合而得之超氧陰離子產生系統做檢測,結果發現在含有固定濃度之XOD溶液中,在xanthine濃度範圍1.0x10-7~3.0x10-4M有線性關係,此時超氧陰離子的濃度為<4.3x10-7~1.6x10-4M,較PPD/SOD/Pd/GC電極檢測範圍更大且更具選擇性。