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Author: 洪碩偉
Shuo Wei Hung
Thesis Title: 磁性奈米粒子在生醫免疫檢應用之研究
Advisor: 洪姮娥
Degree: 碩士
Master
Department: 光電工程研究所
Graduate Institute of Electro-Optical Engineering
Thesis Publication Year: 2005
Academic Year: 93
Language: 中文
Keywords (in Chinese): 磁性奈米粒子生物素鍊脢抗生物素VCAM-1
Thesis Type: Academic thesis/ dissertation
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  • 本研究利用具有超順磁特性的磁性奈米粒子,嘗試發展優異的高靈敏度與高穩定性磁性生物探針。包覆介面活性劑(dextran)後的磁性奈米粒子,可在水溶液中均勻分佈,增加反應速率與與增加感測靈敏度。嘗試以本實驗團隊先前的研究成果為基礎,由磁性奈米粒子標記的生物素(biotin)檢測抗生物素(avidin)的研究開始,檢討並構想更少試劑浪費,更接近實際應用的免疫檢測系統。
    參考酵素連結免疫吸附分析方法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA),設計一磁性標記(magnetic indicator)的生物探針(bioprobe)檢測系統,實驗中成功利用包覆磁性奈米粒子的葡聚醣與鍊脢抗生物素(streptavidin)結合,再透過鍊脢抗生物素與生物素之間強大的結合力,與生物素鍊結anti VCAM-1抗體(biotin conjugated anti VCAM-1)組成生物探針。經過嚴密的驗證各個結合部位的結合比例後,最後在實地的活體外(in vitro)實驗中,測量出不同細胞數目下表現出的ICAM-1黏附蛋白質,且與傳統的ELISA檢測方法做一對照比較。初步的實驗結果顯示,磁性奈米粒子免疫檢測法確實具有與目前的ELISA法匹敵或超越它的檢測靈敏度。

    摘要……………………………………………… 1 第一章 緒論…………………………………… 2 第二章 實驗原理與細節……………………… 5 2.1 免疫檢測理………………………… 7 2.1.1 抗原、抗體、與免疫檢測…………… 7 2.1.2 生物素、抗生物素與鍊脢抗生物素 11 2.1.3 磁性奈米粒子與超導量子干儀…… 19 2.2 葡聚醣披覆之磁性奈米粒子製程……… 23 2.3 磁性奈米粒子與生物素之結合………… 30 2.4 製程之改進與磁性分離………………… 36 第三章 奈米磁性粒子於免疫檢測應用之探討42 3.1 磁性免疫複合體檢測系統………………… 42 3.1.1 磁性奈米粒子結合鍊脢抗生物素的驗證52 3.1.2 磁性奈米粒子標記之鍊脢抗生物素與 生物素結合之 ……………………… 57 3.1.3 磁性奈米粒子標記之鍊脢抗生物素與 生物素鏈結抗體結合之驗證 ………… 60 3.2 磁性免疫複合體於免疫檢測之實際應用… 64 第四章 結論………………………………… 70 參考資料……………………………………… 72 致謝…………………………………………… 75

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